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線粒體活性氧ROS檢測試劑盒(純化線粒體)-綠色熒光

簡要描述:產(chǎn)品概述 product description

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質:生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-05-09
  • 訪  問  量:74

詳細介紹

保存溫度
-20℃ 避光
注意事項
1.避免反復凍融。
2.可以根據(jù)需要分裝后凍存。
3.探針為DMSO溶液,在2-8℃時是固體狀態(tài),冬季氣溫較低時為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
有效期
6個月
檢測方法
1.熒光酶標儀 2.熒光光度計
適用樣本
純化線粒體
產(chǎn)品特點
1.使用方便:可用熒光分光光度計、熒光酶標儀檢測;
2.背景低,靈敏度高;
3.線性范圍寬,使用方便。
儀器準備
1.熒光酶標儀 2.熒光光度計, 2.離心機 3.移液器 4.冰箱 5.冰盒
試劑準備
PBS緩沖液或者HBSS
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
4.黑色96孔板
使用注意事項
1.O07染色液為DMSO溶液,冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解,吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預熱,否者容易再次凝固在吸頭內壁產(chǎn)生損耗。 2.使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。 3.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。 4.標記的條件因細胞種類而異,根據(jù)不同樣本的實際染色結果做相應調整,在每次實驗前,請先根據(jù)不同的實驗要求、細胞類型、膜通透性等進行優(yōu)化,確定條件。以下方法僅供參考。 5.染色后立即進行分析。 6.熒光酶標儀檢測必須使用熒光檢測專用的黑色96孔板。
使用方法
染色工作液配制: 根據(jù)樣本數(shù)量,用染料稀釋液將BBcellProbe® O07熒光染料10倍稀釋,再用PBS緩沖液或者其它等滲緩沖液20-40倍稀釋,配制成染色工作液。 O07探針標記: 1.準備新鮮待測線粒體。 【注】: ?一般為大約總蛋白量為10~100 μg的純化的線粒體。 2.將線粒體樣本用200 μl染色工作液重懸,充分混勻。 3.在37℃避光孵育20-60分鐘。 4.孵育結束后,離心收集線粒體。 5.用PBS清洗線粒體一次。離心收集線粒體。 6.用200 μl PBS重懸線粒體。充分混勻。 7.加入熒光檢測用黑色96孔板。 8.置于酶標儀中,后于激發(fā)波長為488 nm、發(fā)射波長526 nm檢測熒光強度。 【注】: ?此處以酶標儀檢測為例。 ?根據(jù)實驗室設備情況,沒有酶標儀的話根據(jù)所使用的熒光光度計所需上樣體積重懸線粒體檢測。 結果處理: 熒光強度強表示線粒體活性氧強度高。 【注】: ?熒光強度強則活性氧(ROS)含量高。 ?可以用實驗中對照樣本的熒光強度值為基準,待測組樣本的熒光強度值占對照樣本的百分比來比較活性氧(ROS)程度差異。

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