還原型（GSH）檢測試劑盒2

簡要描述：產品概述 product description GSH是一種低分子自由基清除劑，它可清除O2-、H2O2、LOOH。還原型是蛋氨酸、和半組成的一種小分子肽，是組織中主要的非蛋白質的巰基化合物，并且是GPX和GST兩種酶類的底物，為這二種酶分解氫過氧化物所必需，并且能穩(wěn)定含巰基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷。最近還證明GSH也參與使VE恢復到還原態(tài)的作用。GSH在防止動脈粥樣硬化、冠心病、防衰老、抗腫瘤、防老年性癡呆等疾病的預防、恢復、治療的研究過程中起到重要參考作用。還原型（GSH）可與二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）反應，生成一種黃色化合物，可在405nm下比色定量測定還原型（GSH）含量。本試劑盒測僅用于科研領域，不可用于臨床診斷或其他用途。貝博®......

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2024-05-09
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詳細介紹

保存溫度

2-8℃ 避光

注意事項

開蓋后組份按要求條件保存。

有效期

6個月

檢測方法

微孔板，酶標儀

適用樣本

血清血漿/全血/組織

產品應用

微孔板，酶標儀

儀器準備

1.酶標儀
2.離心機

試劑準備

1.雙蒸水

耗材準備

1.一次性手套
2.吸頭

使用注意事項

1.血液中的GSH幾乎全部存在于紅細胞內，可以用每升全血中GSH的克數來表示，也可用每克Hb中GSH含量來表示；
2.計算時應用消光系數，故比色計要校正波長。用標準管計算較方便、準確；
3.吸取上清時，用帶刻度的5ml滴管，或者移液器，避開表面的一層薄膜，插到上清液中吸取2ml做顯色反應；
4.每批實驗做2個標準管、空白管，以減少操作誤差；

使用方法

試劑工作液配制：
1. 試劑A為過飽和溶液，如有結晶，則取上清使用；

2. GSH標準溶劑工作液：
溶劑儲備液：雙蒸水=1：9稀釋，即為GSH標準溶劑工作液，現用現配。

3. 1mmol/LGSH標準溶液的配制：GSH分子量為307，每次測定前將3.07 mg的GSH標準品加到10mlGSH的溶劑工作液中，混勻，現用現配。

4. 20μmol/LGSH標準溶液的配制:取1mmol/LGSH標準溶液0.2ml加GSH標準溶劑工作液9.8ml，現用現配。

樣本的前處理：
1. 培養(yǎng)細胞：將收集好的細胞，用PBS清洗1~2次，低速離心收集沉淀細胞，再加入0.3-0.5ml 0.1M pH7.4的等滲PBS緩沖液重懸細胞，超聲或手動研磨破碎細胞后待測；
上清液制備：
取破碎后的細胞懸液0.1ml,加0.1ml試劑A混勻，3500轉/分離心10分鐘，取上清液1ml待測；

2. 血清（漿）：取0.05ml,加試劑A0. 2ml混勻，3500轉/分離心10分鐘，取上清液待測；

3. 全血樣本的處理：1:9溶血液的制備：取0.1ml肝素抗凝全血加雙蒸水0.9ml，充分混勻，直至透亮為止；
上清液制備：取0.05ml,加試劑A0. 2ml混勻，3500轉/分離心10分鐘，取上清液待測；

4. 組織樣本：10%勻漿液的制備：準確稱取組織重量，按重量（g）：體積（ml）=1:9比例加入9倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下機械勻漿，2500轉/分，離心10min，取上清液待測；
上清液制備：取0.1ml,加0. 1ml試劑A 0. 1ml混勻，3500轉/分離心10分鐘，取上清液待測；

計算：

（1）全血計算公式：
全血中GSH含量 = 測定OD值 – 空白OD值 x 標準品濃度 x 樣本前處理 x 樣本測定前
（umol/L）標準OD值 - 空白OD值（20umol/L）稀釋倍數（5倍）稀釋倍數（10倍）

（2）細胞及組織計算公式：

GSH含量 = 測定OD值 – 空白OD值 x 標準品濃度 x樣本前處理 ÷ 待測勻漿蛋白
（umol/gprot）標準OD值 - 空白OD值（20umol/L）稀釋倍數（2倍）濃度（gprot/L）

（3）血清（漿計算公式）

GSH含量 = 測定OD值 – 空白OD值 x 標準品濃度 x樣本前處理
（umol/L）標準OD值 - 空白OD值（20umol/L）稀釋倍數（5倍）

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