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植物總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)

簡要描述:產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 植物蛋白提取試劑盒(雙向電泳用)可以從各種植物樣本中提取總蛋白,提取過程簡單方便。 該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白用于雙向電泳。 如需要用于報告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Western blotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活分析等下游實驗的試劑盒,請選用貝博其他貨號的試劑盒。 貝博® BBproExtra® 可以提供針對動物細(xì)胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-05-09
  • 訪  問  量:48

詳細(xì)介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
雙向電泳
適用樣本
植物
產(chǎn)品應(yīng)用
雙向電泳
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1. 提取液的準(zhǔn)備:
根據(jù)所需要提取的樣本量,每500ul蛋白提取液A中加入5ul試劑B和2ul蛋白酶抑制劑混合物,充分混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的100-200mg植物組織樣本用刀盡可能剪碎。
3. 加入500ul提取液,充分混勻,用勻漿機(jī)/勻漿器充分勻漿或者置于研缽中用液氮研磨。
4. 置振蕩器上振蕩20-40分鐘。
5. 在12000×g條件下將提取液離心10分鐘。
6. 將上清吸入另一干凈離心管,即可得到植物總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灮騎CA/丙酮沉淀后進(jìn)行下游實驗。
常見問題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分組織樣本時可能沒有裂解,導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。
參考文獻(xiàn)
1.Na Zhao, Xinyue Xu, Yashitola Wamboldt, Sally A. Mackenzie, et al.
MutS HOMOLOG1 silencing mediates ORF220 substoichiometric shifting and causes male sterility in Brassica juncea
Journal of Experimental Botany 2016 67 (1): 435-444. (IF=5.677)

2.XiaokangLi, LiMu, DandanLi, et al.
Effects of the size and oxidation of graphene oxide on crop quality and specific molecular pathways
Carbon 2018 (IF=7.082)

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