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血漿蛋白提取試劑盒(2D電泳用)

簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 血漿總蛋白提取試劑盒(雙向電泳用)適用于從各種動(dòng)物血漿樣本中提取總蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取試劑中不含鹽,可直接用于等點(diǎn)聚焦電泳、雙向電泳等下游蛋白研究。如下游實(shí)驗(yàn)需要用于Western Blotting、SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀,請(qǐng)使用貝博其他貨號(hào)的試劑盒。需要提取血清、全血、血細(xì)胞等樣品的蛋白,請(qǐng)使用貝博其他貨號(hào)的試劑盒。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白,下游應(yīng)用范圍廣。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-05-09
  • 訪  問(wèn)  量:48

詳細(xì)介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完!
有效期
一年
檢測(cè)方法
雙向電泳
適用樣本
動(dòng)物血漿
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、 使用方便。
2、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
3、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產(chǎn)品應(yīng)用
雙向電泳
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng)
使用注意事項(xiàng):
? 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
? 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1. 提取液制備:
每200ul蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取抗凝全血樣品,在4℃,1500×g條件下離心10分鐘,棄細(xì)胞沉淀,留上清。
3. 取上清血漿,每100ul血漿樣本中加入100-200ul蛋白提取液,充分混勻后,在4℃條件下靜置5分鐘。
4. 在4℃,14000×g條件下離心10分鐘。
5. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即可得到血漿蛋白。
6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
7. 根據(jù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)要求用蛋白稀釋液稀釋血漿蛋白樣品至所需濃度。
常見(jiàn)問(wèn)題分析
1.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份,導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過(guò)透析處理或者用脫鹽柱改換過(guò)緩沖體系,則可以用Bradford法定量。
2.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結(jié)構(gòu),沒(méi)有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

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