SDS裂解液

簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品概述 product description 貝博SDS裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制，對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用，是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)。貝博SDS裂解液中已含常用磷酸酶抑制劑。

產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間：2024-05-09
訪問(wèn) 量：53

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產(chǎn)品分類

CLASSIFICATION

蛋白質(zhì)生物學(xué)

蛋白提取和裂解細(xì)胞器分離蛋白純化蛋白質(zhì)濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學(xué) 查看全部產(chǎn)品

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詳細(xì)介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項(xiàng)

1.蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

有效期

1年

檢測(cè)方法

WB、IP等

適用樣本

細(xì)胞、組織

產(chǎn)品應(yīng)用

WB、IP等

儀器準(zhǔn)備

1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機(jī)/勻漿器

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液（pH7.4，實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒

耗材準(zhǔn)備

? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實(shí)驗(yàn)如果是進(jìn)行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測(cè)，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過(guò)程保持低溫操作，縮短離心時(shí)間。

使用方法

A．細(xì)胞裂解
1. 裂解液制備：每1ml冷的SDS裂解液中加入4ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
3. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個(gè)細(xì)胞中加入500ul冷的裂解液（每106個(gè)細(xì)胞加100ul SDS裂解液。大約相當(dāng)于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個(gè)75 cm2培養(yǎng)瓶加1~2 ml。裂解液和細(xì)胞應(yīng)充分接觸。如果SDS裂解液不足量，細(xì)胞裂解效率將會(huì)降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。

B．組織裂解
1. 裂解液制備：每1ml冷的SDS裂解液加入4ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無(wú)明顯肉眼可見(jiàn)固體。
3. 將組織勻漿吸入另一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
4. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br>

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