皮膚組織蛋白提取試劑盒

簡要描述：產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 皮膚組織蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種動物皮膚組織樣品中提取蛋白。本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為不具有天然蛋白構象的非活性蛋白。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。本試劑盒提取的蛋白樣本含

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2024-05-08
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蛋白質生物學

蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃ 保存

注意事項

蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

有效期

一年

檢測方法

WB等

適用樣本

皮膚組織

產品特點

1.提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 2.含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。 3.紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。 4.總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。 5.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

產品應用

WB等

儀器準備

1.離心機 2.振蕩器 3.勻漿機/勻漿器 4.渦旋混勻器 5.移液器 6.冰箱 7.冰盒

試劑準備

PBS緩沖液蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管 2.吸頭 3.一次性手套

使用注意事項

1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。 2.蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。 3.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。 4.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。 5.如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。 6.可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

使用方法

1.提取液準備：每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物B和2ul蛋白酶抑制劑混合物C，混勻后置冰上備用。 2.取100-200mg皮膚組織樣本，用PBS洗干凈，然后用刀盡可能剪碎，加入500ul蛋白提取液，用組織勻漿器/勻漿機勻漿至無明顯肉眼可見固體。 3.將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩30-40分鐘。 4.在4℃，10000-14000×g條件下離心15分鐘。 5.將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到皮膚組織蛋白。 6.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?

常見問題分析

1.蛋白濃度低？處理部分組織樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。皮膚組織蛋白質含量較低，適當加大組織上樣量。 2.用什么方法定量蛋白？建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

參考文獻

1.Guoying Miao, Li Sun, Baoguo Liu, et al. MMP9 and RECK expression in cutaneous lichen planus Int J Clin Exp Pathol 2016

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